RMC可视化超薄切片机切片前的样本制备
样本质量直接决定切片成败。PowerTome PCZ对样本的基本要求是:包埋块硬度均匀、切面平整、无杂质。正确操作是发挥设备性能的关键。以下为PowerTome PCZ标准操作流程及注意事项:
松开样品夹旋钮,将包埋块或冷冻样品放入卡槽,确保底面与样品台贴合;
调节三维微调旋钮,使样品切割面与刀刃平行(可通过观察窗初步确认);
触控屏进入“参数设置"界面,输入目标厚度(如50nm);
根据样品硬度调节切片速度(树脂建议2mm/s,冰冻组织建议1mm/s);
点击“开始"按钮,观察切片过程,若出现卷边或断裂,立即暂停调整;
规范操作可将设备故障率降低60%,延长核心部件寿命。生物样本:以小鼠肝脏为例,流程包括:①固定(4%戊二醛4℃过夜,1%锇酸后固定2h)→②脱水(梯度乙醇:50%→70%→90%→100%,每步1h)→③渗透(1:1乙醇/环氧树脂→纯树脂,过夜)→④包埋(60℃聚合48h)。包埋后需用专用修块机将样本修成梯形(底面约1mm×1mm,高度2-3mm),确保切面暴露在中心。若修块不平整,切片时易出现“tiao刀"(切片无法连续)。材料样本:以聚合物薄膜为例,需用冷镶嵌树脂(如LR White)包埋,避免热镶嵌导致样本变形。包埋后样本需在室温下全固化(24h),再安装到PCZ样本头。对于硬脆材料(如陶瓷碎片),需先用环氧树脂浸润,填补内部孔隙,防止切片时碎裂。关键提示: 样本修块后需用锋利单刃刀片预切,去除表层硬化层,确保切面新鲜——这一步常被新手忽略,却是减少切片褶皱的重要措施。RMC可视化超薄切片机切片前的样本制备